ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПОЛИПЕПТИДОВ МОРСКИХ АНЕМОН
Аннотация
В работе приведена методика получения и очистки рекомбинантных
полипептидов, представляющих практический интерес. Это несколько небольших поли-
пептидных компонентов яда морских анемон, обладающих обезболивающим действием:
APETx2, селективно блокирующий протон-чувствительные каналы ASIC3; и три гомоло-
гичных полипептида АРНС1, АРНС2 и АРНС3, модулирующих активность ваниллоид-
ного рецептора TRPV1. Первоначально были получены конструкции для бактериального
синтеза полипептидов в составе слитных белков с фрагментом тиоредоксина, и далее
осуществлена наработка и очистка полипептидов по общей схеме выделения. Биологи-
ческая активность полученных в работе рекомбинантных продуктов соответствовала ак-
тивности, ранее измеренной для природных полипептидов
полипептидов, представляющих практический интерес. Это несколько небольших поли-
пептидных компонентов яда морских анемон, обладающих обезболивающим действием:
APETx2, селективно блокирующий протон-чувствительные каналы ASIC3; и три гомоло-
гичных полипептида АРНС1, АРНС2 и АРНС3, модулирующих активность ваниллоид-
ного рецептора TRPV1. Первоначально были получены конструкции для бактериального
синтеза полипептидов в составе слитных белков с фрагментом тиоредоксина, и далее
осуществлена наработка и очистка полипептидов по общей схеме выделения. Биологи-
ческая активность полученных в работе рекомбинантных продуктов соответствовала ак-
тивности, ранее измеренной для природных полипептидов
Об авторах
Дмитрий Игоревич Осмаков
Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А.
Овчинникова Российской академии наук
Россия
Россия
Ярослав Алексеевич Андреев
Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Ов-
чинникова
Россия
Россия
Сергей Александрович Козлов
Институт биооргани-
ческой химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук
Россия
Россия
Список литературы
1. Андреев Я.А., Козлов С.А., Козловская Э.П., Гришин Е.В. () Анальгетическое действие пептидного ингибитора TRPV1-рецептора в моделях тепловой стимуляции боли // Доклады Академии наук. 2009. №424, 688-691.
2. Зыкова Т.А., Винокуров Л.М., Маркова Л.Ф., Козловская Э.П., Еляков Г.Б. Аминокислотная последовательность трипсинового ингибитора IV из Radianthus macrodactylus // Биоорган. Химия. 1985. №11, 293-301.
3. Зыкова Т. А., Монастырная М.М., Апаликова О.В., Швец Т.В., Козловская Э П. Низкомолекулярные цитолизины и ингибиторы трипсина из морской актинии Radianthus macrodactylus. Выделение и частичная характеристика // Биоорган. Химия. 1997. №54, 509-516.
4. Ильина А.П., Монастырная М.М., Исаева М.П., Гузев К.В., Рассказов В.А., Козловская Э.П. Первичная структура актинопоринов актинии Oulactis orientalis // Биоорган. Химия. 2005. №31, 357- 362.
5. Козлов, С.А., Андреев, Я.А., Мурашев, А.Н., Скобцов, Д.И., Дьяченко И.А., Гришин Е.В. Новые полипептидные компоненты с анальгетической активностью из морской анемоны Heteractis crispa // Биоорганическая химия. 2009. №35, 789-798.
6. Монаcтырная М.М., Козловская Э.П., Иванов А.С., Мольнар А.А., Халилов Э.М., Еляков, Г.Б. Действие метридиолизина из морской анемоны Metridium senile на биологические и модельные мембраны // Биол. Мембраны. 1988. №5, 830-835.
7. Сокотун И.Н., Лейченко Е.В., Вакорина Т.И., Еськов А.А., Ильина А.П., Монастырная М.М.,Козловская Э.П. Ингибитор сериновых протеиназ из актинии radianthus macrodactylus: выделение и физико-химические свойства // Биоорган. Химия. 2007. №33, 448-455.
8. Anderluh, G. and Macek, P. Cytolytic peptide and protein toxins from sea anemones (Anthozoa: Actiniaria) // Toxicon. 2002. №40, 111-124.
9. Anderluh, G., Pungercar, J., Strukelj, B., Macek, P. and Gubensek, F. Cloning, sequencing, and expression of equinatoxin II // Biochem Biophys Res Commun. 1996. №220, 437-442.
10. Andreev, Y. A., Kozlov, S. A., Koshelev, S. G., Ivanova, E. A., Monastyrnaya, M. M., Kozlovskaya, E. P. and Grishin, E. V. Analgesic compound from sea anemone Heteractis crispa is the first polypeptide inhibitor of vanilloid receptor 1 (TRPV1) // J Biol Chem. 2008. №283, 23914-23921.
11. Antuch, W., Berndt, K. D., Chavez, M. A., Delfin, J. and Wuthrich, K. The NMR solution structure of a Kunitz-type proteinase inhibitor from the sea anemone Stichodactyla helianthus // Eur J Biochem. 1993. №212, 675-684.
12. Bosmans, F. and Tytgat, J. Sea anemone venom as a source of insecticidal peptides acting on voltage-gated Na+ channels // Toxicon. 2007. №49, 550-560.
13. Carli, A., Bussotti, S., Mariottini, G. L. and Robbiano, L. Toxicity of jellyfish and sea-anemone venoms on cultured V79 cells // Toxicon. 1996. №34, 496-500.
14. Cline, E. I., Wiebe, L. I., Young, J. D. and Samuel, J. Toxic effects of the novel protein UpI from the sea anemone Urticina piscivora // Pharmacol Res. 1995. №32, 309-314.
15. Deval, E., Noel, J., Lay, N., Alloui, A., Diochot, S., Friend, V., Jodar, M., Lazdunski, M. and Lingueglia, E. ASIC3, a sensor of acidic and primary inflammatory pain // Embo J. 2008. №27, 3047-3055.
16. Diochot, S., Baron, A., Rash, L. D., Deval, E., Escoubas, P., Scarzello, S., Salinas, M. and Lazdunski, M. A new sea anemone peptide, APETx2, inhibits ASIC3, a major acid-sensitive channel in sensory neurons// Embo J. 2004. №23, 1516-1525.
17. Dixon, M. The determination of enzyme inhibitor constants // Biochem J. 1953. №55, 170-171.
18. Elliott, R. C., Konya, R. S. and Vickneshwara, K. The isolation of a toxin from the dahlia sea anemone, Tealia felina L // Toxicon. 1986. №24, 117-122.
19. Grotendorst, G. R. and Hessinger, D. A. Purification and partial characterization of the phospholipase A2 and co-lytic factor from sea anemone (Aiptasia pallida) nematocyst venom // Toxicon. 1999. №37, 1779-1796.
20. Honma, T., Kawahata, S., Ishida, M., Nagai, H., Nagashima, Y. and Shiomi, K. Novel peptide toxins from the sea anemone Stichodactyla haddoni // Peptides. 2008. №29, 536-544.
21. LaVallie, E. R., DiBlasio, E. A., Kovacic, S., Grant, K. L., Schendel, P. F. and McCoy, J. M. A thioredoxin gene fusion expression system that circumvents inclusion body formation in the E. coli cytoplasm // Biotechnology (N Y). 1993. №11, 187-193.
22. Schweitz, H., Bruhn, T., Guillemare, E., Moinier, D., Lancelin, J. M., Beress, L. and Lazdunski, M. Kalicludines and kaliseptine. Two different classes of sea anemone toxins for voltage sensitive K+ channels // J Biol Chem. 1995. №270, 25121-25126.
Рецензия
Просмотров:
50
Послать статью по эл. почте 